چرا خالی کردن اسپکتروفوتومتر بسیار مهم است؟

خلاصه

چرا خالي کردناسپکتروفوتومترچرا که هر مقدار جذب که گزارش می کنید فقط به اندازه مرجع قابل اعتماد است که در برابر آن اندازه گیری می شود.ابتدا با اندازه گیری یک محلول مرجع، خط پایه را تعیین می کند.بسیاری از اپراتورها فرض می کنند که اپتیک های مدرن باعث می شود که خالی کردن غیر ضروری باشد.اما حتی بهترین مونوکروماتور نمی تواند تجزیه و تحلیل را از ماتریس خود جدا کند بدون یک مرجع ذخیره شده. این مرحله را رها کنید و نتایج شما دارای خطاهای جابجایی پنهان هستند که می توانند محاسبات غلظت را تغییر دهند، منحنی های حرکتی را تحریف کنند و یک حسابرسی را شکست دهند. پاداش ساده است: خطوط پایه پایدار،منحنی های کالیبراسیون خطی و نتایج که از بررسی های نظارتی نجات می یابنداین کتاب راهنما، علم کپی کردن را توضیح می دهد، اشتباهات پرهزینه ای که از آن جلوگیری می شود، و چگونگی استفاده از ابزارهای شبه دو قطعه سنوااسپکتروفوتومتر UV قابل مشاهدهو VB-600اسپکتروفوتومتر قابل مشاهده- مدیریت صحیح خط پایه را با صفر کردن خودکار طول موج، حداقل حرکت و اعتبارسنجی آماده GLP ساده کنید.

خالی کردن چه چیزی است؟

خالی کردن روش است که مرجع جذب صفر یکاسپکتروفوتومترقبل از اندازه گیری نمونه ها. طبق قانون بیر-لامبرت،جذب برابر با لوگاریتم نسبت بین شدت نور عبور از یک مرجع (I0) و شدت عبور از نمونه (I) است.خال خالی حاوی همه چیز نمونه است به جز تحلیلگر: همان حلال، همان بوفر یا ماتریس واکنشگر، و یک کوفت از همان مواد و طول مسیر است.وقتی که ابزار خالی است، این شدت مرجع را به عنوان 100 درصد انتقال ثبت می کند، که معادل جذب صفر است. هر نمونه بعد از اندازه گیری با آن مرجع ذخیره شده مقایسه می شود،بنابراین مقدار گزارش شده فقط منعکس کننده نور جذب شده توسط خود تحلیلگر است..

از نظر نوری، کلوپ کردن سه سهم اجتناب ناپذیر را جبران می کند. اول، خود کوفت مقدار کمی نور را منعکس می کند و جذب می کند، و هیچ دو کوفت کاملا یکسان نیستند. دومماتریس محلول یا واکنشگر در طول موج های خاص جذب می شود.، به ویژه بافرها در منطقه ماوراء بنفش و آب بالاتر از 900 نانومتر.اسپکتروفوتومتر قابل مشاهدهاز 320 تا 1100 نانومتر، این تصحیح به همان اندازه مهم است، زیرا آب و بسیاری از بافرها به شدت در منطقه مادون قرمز نزدیک جذب می شوند. سوم، سیستم نوریپنجره ها و آشکارساز یک خالی صحیح هر سه را لغو می کند و یک خط پایه پاک را که بر روی آن اندازه گیری دقیق نمونه می تواند ساخته شود، باقی می گذارد.

در یک طراحی یک قطعه، خال باید قبل از هر سری نمونه اندازه گیری و برداشته شود. در یک طراحی دو قطعه یا شبه دو قطعه مانند Senova UB-600 و VB-600,سیستم نوری به طور مداوم کانال نمونه را با یک کانال مرجع مقایسه می کند.، که باعث جلوگیری از انحراف از لامپ و آشکارساز می شود. حتی در این صورت، اپراتور هنوز هم باید کانال نمونه را با محلول مرجع صحیح خالی کند.چون ابزار نمی تونه ترکیب ماتریس شما رو خودش بدونه.

کالیبراسیون یک منحنی استاندارد ایجاد می کند که جذب را با استفاده از استانداردهای شناخته شده به غلظت تبدیل می کند.در حالی که خالی کردن به سادگی نقطه صفر مقیاس فوتومتری را تعریف می کندهر دو مرحله در روش های تنظیم شده اجباری هستند واسپکتروفوتومتر UV قابل مشاهدهبا یک کلید صفر کردن خودکار، مانند Senova UB-600، خطر خطای اپراتور در این مرحله حیاتی را کاهش می دهد.

چرا باید مواد خالی را در آزمایشگاه های روزمره درست کنیم؟

در آزمایشگاه های پر مشغله کنترل کیفیت، خالی کردن اغلب به عنوان یک رسمیتی در نظر گرفته می شود که باید قبل از شروع اندازه گیری های "واقعی" انجام شود.خطاهای مرتب شده ی آفست که در یک خواندن نامرئی اما در یک دسته آشکار است.. اگر خال اشتباه باشد، هر نمونه همان خطای ارث می برد. یک تغییر جذب 0.05 می تواند به یک خطای غلظت چند درصد تبدیل شود،که ممکن است به معنای تفاوت بین آزاد کردن و رد یک دسته تولید باشد.، یا بین گذراندن و شکست یک مقایسه بین آزمایشگاه.

خطرات در ماتریس های واقعی چند برابر می شود. حلال های رنگارنگ، واکنش دهنده های مبهم، اثر انگشت روی کوفت ها، خراش روی پنجره های نوری، حباب های هوا و گرادیانت های دمایی همه جذب جعلی را اضافه می کنند.بدون خالي بودن درست، تحلیلگران مقادیر منفی جذب را مشاهده می کنند، خطوط پایه حرکت می کنند و قرائت های تکراری که دیگر با هم مطابقت ندارند.چون نقطه مرجع هرگز به درستی تعریف نشده استاین وضعیتی است که آزمایشگاه های باتجربه را به استاندارد سازی روش های خالی خود و انتخاب ابزارهای پشتیبانی از آن سوق می دهد.یک خط پایه تعریف نشده می تواند یک رکورد دسته کامل را باطل کند و آزمایش های تکراری گران قیمت را اجبار کند.

يه حرفه اياسپکتروفوتومتراولین، دقت: UB-600 و VB-600 سنوا دارای تناسب پایه ± 0.001 Abs و حرکت ≤ 0.001 Abs هستند، بنابراین هنگامی که خالی ذخیره می شود،خط پایه در طول یک جلسه کار طولانی ثابت است.دوم، قابلیت اطمینان: با تکرار طول موج ≤0.1 nm، دقت انتقال ≤0.1 درصد T و نور منحرف ≤0.05 درصد T،ابزار اعتبار خال را در کل محدوده 190 تا 1100 نانومتر حفظ می کند..

سوم، بهره وری: صفحه لمسی 7 اینچی، اپراتور را از طریق صفر کردن طول موج خودکار در ثانیه ها هدایت می کند، حدس زدن و تغییرات اپراتور به اپراتور را حذف می کند.ماژول های معتبر سازی GLP ساخته شده برای بررسی دقت فوتومتریک و دقت طول موج، تولید سوابق قابل صادر که کیفیت هر سری اندازه گیری را مستند می کند. برای آزمایشگاه هایی که به دنبال یک تامین کننده قابل اعتماد طیف سنج آزمایشگاهی هستند،این ویژگی ها باعث می شود که خالی کردن یک کنترل شده باشد.به طور خلاصه، خالی کردن نظم و انضباطی در عین حال دقت، بهره وری و اعتبار را محافظت می کند.

اگر شما یک آزمایشگاه طیف کامل و یا رنگ قابل مشاهده و آزمایش غلظت اجرا، Senova یک راه حل:اسپکتروفوتومتر UV قابل مشاهدهپوشش می دهد 190 به 1100 nm با دیوتریوم و لامپ ولفستم در حالی که VB-600اسپکتروفوتومتر قابل مشاهدههمان ثبات شبه دو قطعه را در طول 320 تا 1100 نانومتر فراهم می کند.هر دو ابزار از طریق یک چرخه تضمین کیفیت 32 مرحله ای تولید می شوند و بر روی شاسی آلومینیوم آلیاژ درجه هوافضا با نصب آینه CNC ساخته شده اند.

چگونه به درستی در جریان های کاری واقعی خالی کنید

در کنترل کیفیت داروسازی، خالی کردن قبل از اولین آزمایش شروع می شود. تحلیلگران یک خالی که دقیقا با محیط محلول یا خفیف کننده نمونه مطابقت دارد، پر می کنند.و آن را در موقعیت نمونه قرار دهیددر سونووا UB-600، اپراتور طول موج اندازه گیری را انتخاب می کند، کلید صفر خودکار را فشار می دهد و ابزار خالی را به عنوان مرجع انتقال 100 درصد ذخیره می کند.با پهنای باند طیف 2 نانومتری و نور منحرف ≤00.05 درصد T، حتی محدوده های جذب باریک از مواد فعال در مقایسه با یک خط پایه قابل اعتماد اندازه گیری می شود،که برای آزمایش یکنواخت بودن محتوا و انحلال ضروری است که در آن تصمیم گیری در مورد انتشار دسته بستگی به دقت فوتومتری دارد..

در بیوتکنولوژی، کمی کردن اسید نوکلئیک بر نسبت A260/A280 تکیه می کند، و خالی، بافر رقیق سازی Tris، TE یا آب اندازه گیری شده در همان کوفت کوارتز UV استفاده شده برای نمونه ها است.کوفت های شیشه ای به شدت زیر 320 نانومتر جذب می کنند و خط پایه را خراب می کنند.، به همین دلیل است که Senova کوارتز کوفت و یک نگهدارنده چهار موقعیت تنظیم شده 10 تا 50 میلی متر را عرضه می کند.DNA و پروتئين هاي برنامه ريزي شده UB-600 به طور خودکار در هر طول موج مهم، در حالی که مطالعات حرکتی در طول موج واکنش قبل از اضافه کردن بستر خالی می شوند، بنابراین سرعت آنزیم از یک خط صفر پایدار محاسبه می شود.

آزمایشگاه های محیط زیست و آب از رنگ های خالی واکنشگر برای تصحیح رنگ کمک شده توسط واکنشگر خود استفاده می کنند. در تعیین نیترات معمولی در 220 نانومتر یا تعیین فسفات در 880 نانومتر,تحلیلگر یک واکنشگر خالی را در کنار استانداردها و نمونه ها آماده می کند، ابزار را خالی می کند، و سپس یک منحنی استاندارد چند نقطه ای را با مناسب سازی ریاضی درجه بالا ایجاد می کند.اسپکتروفوتومتر UV قابل مشاهدهداده ها را مستقیما به صورت CSV صادر می کند، سوابق کامل ارزش های خالی، منحنی ها و نتایج نمونه می توانند بدون کلید مجدد در سیستم مدیریت اطلاعات آزمایشگاهی بایگانی شوند.

برای تولید کنندگان مواد غذایی، نوشیدنی و پوشش، یک اسکناسپکتروفوتومتر قابل مشاهدهمانند Senova VB-600 همان نظم و انضباط را به رنگ و شیمی دیدنی می آورد. اپراتور با آب تقطیر شده یا ماتریس نمونه،سپس منحنی های طیف را از 320 تا 1100 nm برای مقایسه سایه ثبت می کند.، بررسی غلظت و مطالعات ثبات. لامپ وولفستم با ردیابی عمر در زمان واقعی اطمینان حاصل می کند که منبع نور بین فواصل نگهداری به یک خط پایه حرکت نمی کند.

کاربران باید یک چک لیست ساده را دنبال کنند: قبل از خالی کردن لامپ را گرم کنید، کوفت را تمیز و خشک کنید، آن را به ارتفاع ثابت پر کنید و از لمس پنجره های نوری اجتناب کنید.هر وقت که طول موج رو عوض کردي دوباره خالي کنبرای حرکت حرکتی یا ثبات طولانی، خط پایه را کنترل کنید و در صورت ظاهر شدن حرکت، دوباره صفر کنید. حتی در دستگاه های پرتو دوگانه،درمان خالی به عنوان لنگر از اندازه گیری ️ تقریبا دو پرتو نوری از UB-600 و VB-600 سرکوب حرکت، اما فقط یک خال صحیح ماتریس را حذف می کند.

انتخاب ابزار مناسب باعث می شود که این روش به راحتی ادامه یابد. اگر هر روش به طول موج زیر 320 نانومتر نیاز داشته باشد، UB-600 را انتخاب کنیداسپکتروفوتومتراگر همه روش ها در محدوده قابل مشاهده باشند، VB-600 انتخاب اقتصادی است. هر دو دارای پهنای باند 2 نانومتری، دقت طول موج ±0.3 نانومتری،ابزار صفر کردن طول موج خودکار و اعتباربخشی GLP ️ مشخصات که خالی کردن صحیح را از یک کار روزانه به یک مزیت رقابتی تبدیل می کند.

سوالات عمومی

• خالي کردن يک اسپکتروفوتومتر به چه معناست؟

  "بلانکنگ" با اندازه گیری محلول خالی که همه چیز را به جز تحلیلگر شامل می شود، مرجع صفر را تعیین می کند. ابزار این را به عنوان 100 درصد انتقال ذخیره می کند،بنابراین مقادیر بعدی نمونه تنها جذب را نشان می دهد که توسط خود تحلیلگر کمک می کند.این اولین گام ضروری برای هر اندازه گیری فوتومتریک دقیق است. بدون آن، خواندن نمونه شامل پس زمینه کل سیستم اندازه گیری است.

• چرا اگر دستگاه رو خالی نکنم، نمایه ها در حال حرکت هستند؟

  بدون خالی کردن، جذب محلول، کوفت و سیستم نوری در هر خواندن در نظر گرفته شده است.ایجاد خطاهای جابه جایی که در طول یک سری طولانی رشد می کنند و نتایج غلظت را تحریف می کننددر موارد شدید، یک خط پایه غیر خالی حتی می تواند مقادیر جذب منفی را تولید کند که داده ها را غیرقابل استفاده می کند.

• چه محلولي بايد به عنوان محلول خالي استفاده کنم؟

  خال باید دقیقاً با ماتریس نمونه مطابقت داشته باشد: همان نوع حلال، بافر، واکنش دهنده و کوفت، اما بدون آنالیت.یک واکنش کننده خالی را به همان روش نمونه ها آماده کنید.از کوارتز درجه UV زیر 320 nm استفاده کنید، زیرا شیشه نور ماوراء بنفش را جذب می کند و خط پایه را خراب می کند.

• در طول یک سری اندازه گیری چقدر باید دوباره خالی کنم؟

  برای هر زمان که طول موج، حلال، کوفت یا طول مسیر را تغییر می دهید، پس از گرم کردن لامپ و در ابتدای هر دسته.به طور دوره ای خط پایه را بررسی کنید و در صورت بروز انحراف دوباره صفر کنید.. ابزارهای Senova خط پایه را ذخیره می کنند و وضعیت عمر لامپ را به طور خودکار گزارش می دهند. یک روال سازگار مانع از باطل شدن یک دسته کامل توسط یک صفر حرکت می کند.

• تفاوت بین خالی کردن و کالیبراسیون چیست؟

  خالی کردن مرجع صفر یا 100 درصد انتقال را برای خواندن جذب تعریف می کند، در حالی که کالیبراسیون یک منحنی استاندارد ایجاد می کند که جذب را با استفاده از استانداردهای شناخته شده به غلظت تبدیل می کند.هر دو مورد مورد نیاز هستند: خالی کردن اطمینان می دهد که هر اندازه گیری درست است و کالیبراسیون اطمینان می دهد که نتیجه غلظت نهایی درست است.اکثر روش های نور سنجی تنظیم شده هر دو مرحله را در روش های نوشتاری خود مشخص می کنند..

• آیا اسپکتروفوتومترهای دوقطبی هنوز نیاز به پاک کردن دستی دارند؟

  بله. طراحی دو لامپ یا شبه دو لامپ به طور مداوم حرکت لامپ و آشکارگر را جبران می کند، اما کانال نمونه هنوز باید با محلول مرجع صحیح خالی شود.UB-600 و VB-600 سنوا اضافه کردن صفر کردن طول موج خودکار برای این قدم سریع، قابل تکرار و مستقل از اپراتور است. این امر شایع ترین منبع خطای پایه وابسته به اپراتور را در آزمایشگاه های معمول از بین می برد.

نتیجه گیری

خالی کردن یک رسمیتی نیست، این پایه ی داده های قابل اعتماد فوتومتریک است. خالی کردن صحیح محلول را از بین می برد،کوفت و پس زمینه ابزار به طوری که هر مقدار جذب تنها منعکس کننده تحلیلگر، حفاظت از تصمیمات انتشار دسته، نتیجه گیری های تحقیق و سوابق حسابرسی به طور یکسان.اسپکتروفوتومتر UV قابل مشاهدهو VB-600اسپکتروفوتومتر قابل مشاهدهترکیب صفر کردن طول موج خودکار، حرکت ≤0.001 Abs، پهنای باند 2 نانومتری و ابزارهای اعتباربخشی GLP، بنابراین هراسپکتروفوتومترکاربر می تواند در عرض چند ثانیه به درستی خالی کند و تمام روز با اطمینان اندازه گیری کند. به طور خلاصه، خالی کنید، با اطمینان اندازه گیری کنید و اجازه دهید داده ها برای خود صحبت کنند.

براي استاندارد کردن اندازه گيري هاي اسپکتروفوتومتريکتون آماده هستيد؟یک کاتالوگ محصول یا توصیه های کاربردی تیم ما به شما در انتخاب بین UB-600 و VB-600 کمک می کند و یک پروتکل خالی را تنظیم می کند که با روش های شما مطابقت دارد.